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Ezio di Firenze, der nun zur Bruderschaft der Assassinen gehört, kämpft in Rom gegen den lasterhaften Borgia-Papst Alexander VI. Den Assassinen muss es gelingen, das Volk vom Joch der brutalen Familie zu befreien. Besonders Cesare, Sohn Alexanders und ein fähiger Heerführer, muss ausgeschaltet werden. Er träumt davon, ganz Italien unter seine Herrschaft zu zwingen. Auch Ezio ist ein herausragender Kämpfer. Das Genie Leonardo da Vinci und der kühl kalkulierende Macchiavelli stehen ebenfalls auf der Seite der Assassinen, sodass es mit vereinten Kräften gelingen wird, Cesare Borgia zu vernichten.